尼康显微镜矫正项圈的校准

2016-05-13技术资料

大多数显微镜物镜被设计成与盖玻璃具有0.17毫米的标准厚度和1.515的折射率,这是令人满意的,当物镜的数值孔径为0.4或更小使用。 然而,使用高数值孔径干物镜(0.8或更大的数值孔径),只有几微米的玻璃盖的厚度变化时导致剧烈图像劣化由于像差,生长恶化而增加玻璃盖的厚度。 为了补偿这个误差,在更高度校正的物镜配有校正,以允许调整所述中央透镜组的位置,以与在盖玻璃厚度的波动相一致。 这种互动式的教程探讨修正衣领如何调整,以达到Zui佳图像质量。

教程初始化与随机选择的试样中出现显微图像窗口和定位在图像窗口的右侧的校正物镜的剖切图。 此外,在初始化时,本教程会自动选择一个随机盖玻片厚度标本被认为在显微镜图像窗口。 为了操作教程,使用校正领滑(注意, 可移动镜头组在物镜上也翻译这个滑块)来调整这个值约为0.17,或标准盖板玻璃的厚度。 下一步,使用显微镜聚焦滑块,以获得清晰的图像标本可能。 取决于预先选定的护罩玻璃的厚度(由教程确定),检体图像,可能会降低或变得更尖锐作为滑块移动到右侧或左侧。 继续使用两个校正项圈和显微镜焦点滑块以提高检体的图像。 在本教程护罩玻璃校正覆盖厚度变化范围从0.10至0.25毫米。

标准厚度为盖玻片为0.17毫米(170微米),其被指定为数字1.5护罩玻璃。 不幸的是,并非所有的1.5盖板玻璃的制造,这种密切的宽容和许多标本具有广泛变化的他们和玻璃盖之间的折射率的介质。 补偿玻璃盖厚度可以通过调节显微镜的机械管的长度或通过专门的校正环能够改变物镜筒内临界透镜元件之间的间隔的利用来实现。 校正套环调整,以补偿这些细微的差别,并确保Zui佳的物镜性能。 与矫正项圈正确应用的物镜要求在显微镜的经历,并提醒足以重新使用适当的图像标准的衣领。 在大多数情况下,焦点可能转向和图像可能调整校正领的过程中徜徉。 使用下列步骤进行小的增量调整,物镜的修正领,同时观察变化的样本图像。

  • 定位校正,这样在物镜桶指示标记刻在衣领住房0.17毫米刻度线重合。

  • 将在载物台上的标本,并聚焦显微镜上的一个小样本的特征。

  • 旋转校正衣领非常轻微和重新聚焦的目的,以确定是否所述图像具有改善或退化。由于这样的事实,大部分试样的准备从玻璃盖遭受/媒体三明治太厚,通过尝试更大的补偿值(0.18-0.23)首先启动旋转实验。

  • 重复前面的步骤,以确定该图像被改善或降低作为校正套环被接通在一个单一的方向。

  • 如果图像已退化,按照相同的步骤并旋转校正衣领向相反的方向(朝向下的值)来查找位置提供Zui佳的分辨率和对比度。

当工程师设计高数值孔径干物镜,它们包括的光学性质和定位在所述前透镜和玻璃盖在计算之间以满足光学校正等光程和正弦条件介质的厚度。 物镜旨在与油用作成像介质被视为好像该培养基中的前透镜的延伸,并且相应地校正。 与前透镜和盖玻璃之间的空气用非浸渍的物镜,在玻璃盖的厚度和分散性能的微小变化能成为色,球形,和慧差的来源。 此问题也发生在针对沉浸在甘油或水成像标本的物镜。 使用具有校正一个物镜需要大量的实践和认真关注。 当套环被调整,焦点趋于移位和图像经常飘荡,从而导致聚焦误差和增加像差工件。