奥林巴斯显微镜光路梯度和强度分布
在经历了由正交波前穿过在微分干涉对比(DIC)显微镜标本的光路差由光学系统转换为振幅的变化在目镜观察到的Zui终图像。这种互动式的教程探讨了各种半透明的标本光路梯度和幅度(强度)型材之间的关系。
教程初始化与一个随机选择的标本图像显示在左侧的窗口,以及一对对角线蓝线以45度角慢慢遍历图像的检体部分。诺马斯基棱镜在微分干涉显微镜的剪切轴(x)由双头白色箭头位于检体图像窗口(的下角所示注:在显微镜的剪切轴线平行于所述对角线)。作为对角线蓝线跨越图像行进,对应于该两个蓝色线之间的薄角切片试样的振幅信息标在DIC振幅资料窗口。此外,光程差(OPD)沿对角线切片呈现在光程差窗口。(奥林巴斯显微镜)
以手动操作教程,先点击暂停按钮来停止双蓝线的议案。接下来,放置在线路的鼠标光标,然后点击并拖动线跨越图像在沿着试件表面的任何切片,以查看振幅型材和光程差的变化。以这种方式,不同的振幅信息和关系到相应的光程差,可以检测和比较,在对试样和周围背景的每个点。经过一个标本已被彻底研究,使用选择一个样本下拉菜单中选择具有不同的配置文件的新标本。该Applet速度滑块可以用于改变在其中蓝色对角线自动遍历试样图像的速度。
之后,由分束棱镜产生正交波前穿过标本相梯度,它们是通过微分干涉由第二棱镜和分析器(另一个偏振片)重组,得到梯度的高对比度的再现。两个微分干涉对比,相位相反的依靠取样光束和参考光束之间样品的相位差的基础上变化的幅度,以产生一个图像。相衬转换从通过检体和参考光束穿过聚光镜纤维环,试样,并且相板衍射光波之间呈现的相位变化图像振幅信息。在区别,然而,DIC图像对应从试样的光程差所得的梯度分布到数学第一衍生物,而不是幅度。
光路梯度和在DIC显微镜强度分布之间的关系示于图1中。图1中呈现的样品(a)是一个环形人红血球与由双指示的剪切轴微分干涉相衬成像的高倍率-headed箭头(西北向东南)。光程差(纵轴)与红细胞的沿剪切轴(横坐标)的横截面的曲线图显示在图1(b)中。请注意,光路配置文件反映薄中心厚边人类血细胞展出。横跨微分干涉反差图像的强度扫描,这非常接近地对应于所述光学路径差曲线的第一导数(图1(b))时加入到一个常数,是在图1(c)中。在红细胞光学路径剖面正和负斜坡产生较高和较低的振幅,分别在一阶导数的扫描和相应的微分干涉对比图像的区域。表现出在斜率不变化的光程差分布的区域具有相同的强度为背景和对应于光程差的一阶导数曲线的基线。